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逆转录-聚合酶链反应

更新:2015-10-5 22:20:59      点击:
介绍

逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)

逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)可以:(1)分析基因的转录产物;(2)获取目的基因;(3)合成cDNA探针;(4)构建RNA高效转录系统。

miR-23a扩增曲线


miR-23a熔解曲线


服务内容
Real-time qPCR就是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。由于Real-time qPCR的众多优点,现在已经是生命科学领域的一项重要技术,并成为基因表达差异和文章发表不可或缺的部分。real-time qPCR输出的数据不同于常规PCR电泳检测,很多没有做过real-time qPCR的研究者常常感到高深莫测,不知从何入手;甚至一些做过一些实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑。很多时候,尽管知晓qPCR的原理和基本操作,仍然浪费时间和精力,而得不到好的结果或对大量的数据不知所措。

江阴雨汐生物的real-time qPCR技术服务,根据实验目的,设计实验方案(相对定量或绝对定量;SYBR Green I或Taqman探针方法),用完全按照符合国际标准(MIQE)的real-time qPCR试剂完成实验,提供符合文章发表的客观事实实验报告和原始数据。

服务说明
1需提供新鲜或保存完好的细胞(至少5×10^6)、组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材料;
2或纯化好的总RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好)或总DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之间,完整性好);
3或反转录好的cDNA不少于30μl(反转录的总RNA完整性好,纯度在1.9-2.1之间);
4 同时提供待测基因序列或登录号。

报告内容
总RNA(或DNA)浓度,电泳图片,扩增曲线,熔解曲线,Ct值以及数据统计分析(可选)

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